O-糖切割酶采用大肠杆菌表达，是一种具有高度特异性的糖蛋白酶，可以特异性识别粘蛋白型 O-连接糖（无论是否唾液酸化）的丝氨酸或苏氨酸残基，并在其 N 端进行切割。可产生适用于质谱分析的 O-糖肽。该酶含有6X His-Tag，可方便在反应后去除。