引加生物的TdT末端转移酶来源于小牛胸腺，采用大肠杆菌重组表达，是一种非模板依赖的DNA聚合酶，可催化脱氧核苷酸结合到DNA分子的3’羟基端，带有突出、凹陷或平滑末端的单双链DNA分子（至少含有3个碱基）均可作为TdT末端转移酶的底物，加尾长度可达5~300nt，反应体系中存在Co²⁺可以增强加尾的效率。金属离子螯合剂，较高浓度的铵根离子、氯离子、碘离子和磷酸根离子均对TdT末端转移酶活性具有抑制作用。

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