引加生物的T4 RNA连接酶2（截短型KQ）是在大肠杆菌中重组表达的引入了R55K和K227Q双突变的截短型的T4 RNA连接酶2。该连接酶可特异性地将DNA或RNA的预腺苷酰化的5’末端连接到RNA的3’OH末端。该酶在连接过程中不消耗ATP进行反应，但需要预腺苷酰化接头以开启反应。R55K突变提高了酶的连接活性，而K227Q突变后大大降低了该酶原本所含有的轻微的从5’预腺苷酰化的DNA接头(AppDNA)将腺苷基团转移到RNA 5’磷酸基团的同时形成5’磷酸化DNA接头(pDNA)的活性，从而减少了RNA的非特异性连接例如RNA串联或自连成环。另外，只能利用5’端预腺苷酰化的单链DNA或RNA作为3’端接头，不消耗ATP，可大大降低连接反应的背景，通常是克隆microRNA或建库时的优先选择。65℃热处理20分钟可使该酶失去活性。

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